Determinacion de Acido Cianhidrico en Visceras
Determinacion de Acido Cianhidrico en Visceras
Las intoxicaciones con cianuro son producidas específicamente por la liberación de ácido cianhídrico (HCN) del KCN y NaCN. El cianuro de sodio es más tóxico que el de potasio porque desprende mas HCN por gramo de compuesto
El HCN es un líquido volátil, incoloro de olor característico a almendras amargas cuya densidad es menor que la del aire siendo un compuesto muy volátil. Su límite de toxicidad es de 10ppm pero a partir de las 5ppm ya comienza a ser anestésico.
M E T O D O S · C U A L I T A T I V O S
Consisten en la detección de ácido cianhídrico en el recipiente donde se encuentra la muestra. El mismo puede deberse a dos tipos de procesos: hidrolíticos y putrefactivos
Hidrolíticos
CN - + H2O ---- CNH + OH -
Putrefactivo (en vísceras en estado putrefactivo)
CN - + CO2 + H2O ---- CNH + CO3H -
A. Ensayo con O-toluidina:
El HCN es un compuesto reductor, pero en contacto con el cobre se comporta como oxidante. El ensayo se fundamenta en la oxidación de las sales cúpricas a sales cuprosas insolubles o poco disociadas. Al hacer reaccionar el compuesto Cu(II)-cianuro con o-toluidina (reductora), se observa un derivado coloreado azul.
Esta reacción es altamente sensible pero inespecífica, también se puede usar bencidina, fenoftaleína o cualquier sustancia que al oxidarse forme un complejo coloreado.
Reactivos
Solución acuosa de sulfato de cobre al 0.2%
Solución alcohólica de O-toluidina al 1%.
Procedimiento
1.- Se embebe papel de filtro en una solución de SO 4 Cu.
2.- A continuación se realiza lo mismo con la solución alcohólica de o-toluidina y se introduce en el recipiente que contiene la muestra a analizar.
3.- Se produce la siguiente reacción con un compuesto de color azul verdoso de forma inmediata que rápidamente vira al azul neto .
8HCN + 8 SO 4 Cu + 4 H 2 O ---- 2 (CN Cu) 2 (CN Cu) 2 + 8 SO 4 H 2 + 2 O 2
De obtener un resultado positivo deberá procederse con un ensayo de confirmación más específico. El ensayo presenta interferencias de tipo oxidantes directos de la o-toluidina y reductores que actúan de la misma forma que el cianuro sobre las sales de cobre.
B .Ensayo de Magnin:
Se basa en la formación de azul de Prusia por la combinación del CN con sales ferrosas.
Reactivos
Solución acuosa de hidróxido de sodio al 2%
Solución acuosa de sulfato ferroso al 2% recientemente preparada
Solución de ácido clorhídrico al 25%
Procedimiento
1.- Se impregna una tira de papel con hidróxido de sodio al 2% y se expone en el interior del recipiente unos minutos obteniendo el anión cianuro:
HCN + OH - ---- CN - + H 2 O
2.- Se retira y se extiende sobre una cápsula de porcelana. Se distribuyen sobre la superficie expuesta 4 gotas de solución de sulfato ferroso 2%.
6CN - + Fe +2 ---- [Fe(CN) 6 ] -4
3.- Se observa un precipitado verdoso que luego pasa a castaño (hidróxido férrico).
Fe +2 + 2OH - ---- Fe(OH) 2 precipitado verde
2Fe(OH) 2 + 1/2O 2 + H 2 O ----- 2Fe(OH) 3
4.- Finalmente por agregado de unas gotas de ácido clorhídrico concentrado se observa color azul por formación azul de Prusia.
Fe(OH) 3 + [Fe(CN) 6 ] -4 + 3H + + Na + --- Fe(CN) 6 FeNa + 3H 2 O (azul de prusia)
Es una reacción poco sensible pero muy específica
Siempre se efectúan por lo menos dos reacciones: una muy sensible y otra muy específica. Si las dos reacciones arrojan resultados positivos se realiza el aislamiento.
M E T O D O · C U A N T I T A T I V O
En las intoxicaciones por cianuro es de requerimiento pericial el agregado de concentración de KCN porcentual en el contenido estomacal en el informe. Para esto se procede a la separación de HCN de la muestra y la posterior cuantificación por medio de los kits comerciales para este fin.
Método de microdifusión de Feldstein-Klendshoj.
Reactivos
Hidróxido de sodio 0.1N
Acido sulfúrico 25% en volumen
Procedimiento
1.- En una cápsula de Conway se colocan 5ml de NaOH en el compartimiento interno de la unidad de microdifusión.
2.- El compartimiento externo se colocan 4 ml de contenido estomacal.
3.- Como reactivo liberante se agregan 2 a 3 gotas de ácido sulfúrico al 25% en el compartimiento externo, y se coloca silicona para que el envase quede sellado.
4.- En la cápsula de Conway a temperatura ambiente el ácido cianhídrico difundirá del compartimiento externo al interno siendo fijado como cianuro de sodio en la solución alcalina. Este proceso llevará 4 horas aproximadamente o podrá ser acelerado también con una estufa a 50º
Kit especial para análisis de HCN:
Una vez obtenida la reacción de microdifusión se utilizará un kit comercial sobre el contenido del anillos interno para la cuantificación de NaCN. Cada kit tendrá sus reactivos característicos, pero los mismos se encuentran basados en el método dipiridin barbiturico, que forma un compuesto de color violeta (cuya intensidad depende del contenido de CN de la muestra).
Comparando el color formado con la escala prefijada que trae el kit, se podrá determinar la presencia de NaCN. El nivelde detección es de hasta 30 mg/litro y en ocasiones deberán realizar diluciones para poder cuantificacar correctamente a la muestra.
Es importante recordar que los valores obtenidos deberán ser llevados a KCN a través de su masa atómica para poder informar contenido residual de CN en estómago y también a su relación porcentual.
Bibliografía
http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/toxicos_metalicos/acidos.html
Fuente: http://cienciaforense.com/Pages/Toxicologia/HCN.htm