Precauciones durante la recoleccion y envio de muestras

Precauciones durante la recoleccion y envio de muestras

1. Protección del personal

Las muestras biológicas potencialmente pueden contener agentes patógenos (VIH, hepatitis, meningitis…).
Evitar contacto con la muestra mediante uso de guantes, mascarilla y bata.
Si es posible emplear material desechable
Prohibir comer, beber o fumar durante el proceso de recolección
Recomendar la vacunación al personal que trabaje con este tipo de muestras

2. Protección de la muestra

2.1 Contaminación por material biológico humano:

Se debe a la aparición en el propio indicio biológico de un aporte de material biológico humano ajeno al propio indicio. Produce como resultado la mezcla de perfiles genéticos.

§Contaminación anterior o previa: Se debe a la aparición de material  biológico en el lugar donde luego aparecerán los indicios. Es INEVITABLE y generalmente DIFICULTA la valoración de la prueba.

§ Contaminación coetánea o paralela: El material genético de un indicio se mezcla con ADN de otro origen en el momento de los hechos. Es INEVITABLE y FAVORECE la valoración.

§ Contaminación posterior: Debido al depósito de material genético de diversos orígenes en el indicio con posterioridad al momento de los hechos. Es EVITABLE mediante estrictos protocolos de recolección, embalaje y envío de las muestras, que se detallan en el presente documento.

2.2 Transferencia de indicios biológicos:

Traslado accidental de los indicios de un lugar a otro, ocasionando contaminación o pérdida de la muestra (por ej. pelos).

2.3 Contaminación biológica no humana:

Producida por microorganismos que acaban degradando el ADN por acción, fundamentalmente de exonucleasas. (humedad y altas temperaturas).

▪ Puede ocurrir “a priori” a la recolección de indicios (muestras expuestas a condiciones que favorecen la proliferación bacteriana).
▪ Tras la recolección del indicio si el empaquetado y conservación no es el adecuado.
Produce la DEGRADACION DEL ADN y AUSENCIA DE RESULTADOS, pero NUNCA la alteración de los patrones genéticos.

2.4 Contaminación química:

Producida cuando las muestras se preservan (formol) o se tratan con determinados productos químicos. Por ejemplo, es nocivo cuando para el estudio de huellas dactilares se utilizan líquidos reactivos; los polvos minerales –carbón, talco, etc- no producen alteración alguna.

Afecta principalmente a las fases de extracción y amplificación del ADN, ya que MODIFICAN la estructura química del mismo, lo cual se manifiesta como AUSENCIA DE RESULTADOS EVALUABLES, pero nunca como modificación del patrón genético.

¿ QUE PRECAUCIONES ADOPTAR?

Aislar y proteger, lo más rápidamente posible la escena del delito
Recoger, si es posible, en primer lugar los indicios biológicos
Usar guantes limpios que deben cambiarse con frecuencia.
Evitar hablar o estornudar sobre las muestras. Usar mascarilla.
Usar bata u otro tipo de ropa protectora.
Utilizar material desechable, siempre que sea posible.
No añadir conservantes a las muestras.
Dejar secar a temperatura ambiente previamente a ser empaquetadas.
Empaquetar por separado las muestras.
Empaquetar en bolsas de papel o cartón, evitar las bolsas de plástico, que condensan la humedad y favorecen la proliferación de bacterias que degradan el ADN.
Eliminar todo el material desechable empleado en la recogida de muestras.

TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA

1. Personas vivas

•     Siempre con consentimiento informado.
•     Debe existir un documento firmado con la autorización expresa para realizar el análisis.

MUESTRA SANGUINEA

•     Existe la creencia popular de que en PERSONAS TRANSFUNDIDAS se cambia el patrón genético. Esto es así sólo en teoría, ya que en la práctica la persona debería transfundirse un gran volumen de sangre (casi toda) y concurrir inmediatamente a la toma de muestra para ADN, lo cual le produciría una debilidad y características físicas fácilmente detectables por el personal que realiza la toma. Un par de horas después, ya aparece en la sangre el patrón genético real del individuo, al principio mezclado con el donante de la sangre. De todos modos, en caso de duda pueden tomarse HISOPADOS BUCALES.

•     Se sugiere realizar punción dactilar, depositar una gota –de aproximadamente 1 cm de diámetro- en cualquier tipo de papel de filtro y dejar secar a temperatura ambiente.  Embalar en sobres de papel común. En estas condiciones la muestra dura más de 10 años.
•     No tomar sangre líquida ya que debe conservarse en freezer o se deteriora rápidamente.

HISOPADOS BUCALES

•     No se trata de “saliva” sino de células epiteliales retiradas de la mucosa bucal.
•     2 Hisopos de ambos carrillos, que se colocan en sobres de papel –nunca de polietileno- para evitar la proliferación bacteriana. Los envoltorios de polietileno o celofán, condensan la humedad y favorecen la degradación.


PELOS CON BULBO

•     No se recomiendan como muestras de referencia, debe preferirse hisopados bucales o muestras sanguíneas.
•     De ser necesario, UN SOLO pelo con bulbo es suficiente, pero se recomienda recolectar no menos de tres mediante arrancado, y fijarlos mediante una cinta adhesiva a una placa de cartulina o plástico. Se sugiere no usar portaobjetos de vidrio, ya que pueden romperse durante el traslado.

2. Cadáveres

-         EN BUEN ESTADO DE CONSERVACION

SANGRE post-mortem: 200 microlitros (anticoagulante tipo EDTA), colocar sobre papel de filtro.
MUSCULO ESQUELETICO: Aprox 1 gr. Se almacena en un recipiente de plástico y tapón de rosca. Conservar en freezer.
PIEZAS DENTALES: 2 (molares). Dejar en reserva a temperatura ambiente, con el fin de evitar la exhumación si se requieren estudios de ADN meses o años después.

-         EN AVANZADO ESTADO DE PUTREFACCION O ESQUELETIZADOS

HUESO LARGO: Fémur, húmero…
PIEZAS DENTALES: 2 (molares). No dañados externamente ni sometidos a endodoncias.

-         QUEMADOS O PARCIALMENTE CARBONIZADOS

•     Cuando la carbonización no es total es posible analizar MÚSCULO ESQUELÉTICO de zonas profundas.
•     Cuando la carbonización es total, es recomendable recolectar huesos o dientes, seleccionando aquellos que a simple vista se encuentren en mejor estado. De existir dudas, contactar con el laboratorio.

-         OTRAS MUESTRAS DE REFERENCIA DE INDIVIDUOS FALLECIDOS

œ En hospitales (muestras de sangre, biopsias en parafina, o preparaciones histológicas. No utilizar tejidos fijados en formol.
œ Ámbito familiar (peines, maquinillas de afeitar, saliva en sellos o sobres…)

TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en el lugar de los hechos

1. Manchas secas

En soportes pequeños y de fácil transporte:

Colillas, armas blancas, monedas, llaves, piedras, ramas, papeles. Recoger por separado e introducirlas en bolsas de papel o cajas.

En soportes grandes no transportables:

A) Soporte no absorbente (cristal, metal…): Recoger con un hisopo mojado en agua destilada (dejar secar antes de guardar) o raspar con bisturí y guardar en bolsa de papel.
B) Soporte absorbente (telas, tapicerias…): Recortar la mancha y guardar en bolsa de papel.

2. Indicios húmedos

Ropas,  tapicerías, toallas: Introducir por separado en bolsas de papel madera, Trasladar rápidamente a instalaciones adecuadas, Dejar secar en lugar protegido y sobre una superficie limpia y envolver en papel (por separado). Guardar en bolsas de papel.

3. Indicios líquidos (guardar siempre en freezer)

•Sangre

- En gran cantidad: recoger con pipeta de plástico y depositarla en un tubo con EDTA
- En pequeña cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.
- Coagulada: recoger con una cucharita e introducir en tubo o frasco de plástico.

•Semen

- Preservativos con semen líquido: atar e introducir en un frasco de plástico.
- En escasa cantidad: recoger con hisopo y dejar secar.

•Liq amniotico

- 10 ml, que se introducen en un tubo.

•Orina

- Recoger con pipeta de plástico desechable y depositarla en un tubo o frasco.


4. Pelos
Recolectar cada pelo con pinzas (desechables o bien limpias) y guardarlo en una bolsa de papel

5. Restos cadavéricos
Buen estado de conservación: Tejido muscular sin líquido fijador en frasco de boca ancha y tapón de rosca.

Carbonizados: Músculo esquelético de zonas menos afectadas sin líquido fijador y  en frasco de boca ancha y tapón de rosca

Avanzado estado de putrefacción o esqueletizados: Hueso largo (limpio sin putrílago) y dientes (2 molares).


TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en el cuerpo de la víctima

1. Manchas de sangre, semen u otros fluidos biológicos
Recoger con un hisopo húmedo (agua destilada) la mancha en cuestión, dejar secar a TA y enfundar el hisopo.

2. Saliva en marcas de mordedura
Recoger con un hisopo húmedo (agua destilada) la mancha en cuestión, dejar secar a TA y enfundar el hisopo

3. Uñas
Recoger con una pinza posibles pelos o fibras. Posteriormente cortar el borde superior de las uñas para búsqueda de sangre o piel. Recoger en bolsas de papel por separado.

4. Pelos dubitados
Recoger cada pelo con unas pinzas y colocar en un papel que será doblado e introducido en una bolsa de papel.

TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en casos de agresión sexual

1. Dos tomas bucales mediante hisopos, pasando por debajo de la lengua, encías y dientes.
2. Búsqueda de manchas de semen, saliva o mordeduras: según se indicó anteriormente
3. Dos tomas cervicales, dos tomas vaginales y una de genitales externos, con hisopos estériles limpiando cuello uterino, cavidad vaginal y la región vulvar.
4. Lavado vaginal, empleando 10 ml de suero fisiológico que se recogerá en un frasco o tubo de plástico.
5. Dos tomas anales, con hisopos estériles limpiando el conducto ano-rectal y el margen anal.
6. Ropas que portaba la víctima: guardar en bolsas de papel por separado.

TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS en casos de investigación biológica de la paternidad

1. Si presunto padre, madre e hijo están vivos: descrito anteriormente
2. Si el presunto padre está fallecido

a) Restos óseos o piezas dentales procedentes de la exhumación del cadáver.
b) Análisis de muestras biológicas del fallecido existentes en hospitales o en el ámbito familiar.
c) Análisis de muestras biológicas procedentes de familiares del fallecido.

3. A partir de restos fetales

Recogerlos con unas pinzas en un frasco de boca ancha y con tapón de rosca (sin formol ni otros líquidos fijadores).

SISTEMAS DE EMPAQUETAMIENTO Y PRESERVACIÓN DE MUESTRAS

IMPORTANTE: MANTENER Y ENVIAR REFRIGERADAS Y POR UN MEDIO DE TRANSPORTE RAPIDO CUANDO SE TRATA DE: indicios líquidos, tejidos blandos y órganos, y otras muestras húmedas (que no puedan secarse).

ENVIAR TODA MUESTRA SECA SIN REFRIGERACION.

IDENTIFICACION DE LA MUESTRA

Tipo de muestra
Pertenencia y/o procedencia
Nº de referencia de la muestra

CUSTODIA DE LA MUESTRA

Identificación y firma de la persona que recoge la muestra
Fecha y hora de recolección

EMPAQUETADO

1. Evitar el uso de bolsas de plástico
2. Evitar emplear frascos de cristal
3. Emplear cajas de cartón o sobre de papel
4. Cada muestra en un recipiente precintado o cerrado herméticamente.

RECEPCION DE MUESTRAS EN EL LABORATORIO

1º Rellenar la hoja de custodia:

Nombre de la persona que entrega las muestras
Fecha y hora de entrega
Nombre de la persona que recibe las muestras
Empresa que realiza el transporte

2º Chequear número de referencia de cada muestra y contrastar con el formulario enviado.

3º Comprobar la integridad de los precintos

4º Al abrir los recipientes comprobar que identificación y descripción son correctas

5º Si fuera posible, fotografiar las muestras.

Anotar discrepancias si las hubiera y establecer acciones correctoras.

RECOMENDACIONES DE LA SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE GENETICA FORENSE basadas en la International Society for Forensic Genetics –ISFG- y en el GEP-ISFG.