Fundamentos de las pruebas de ADN

Publicado en Genética Forense

Fundamentos de las pruebas de ADN

Para confiar algo tan importante como la paternidad de una persona a un análisis , este debe estar sólidamente fundamentado sobre bases científicas confiables.

Aunque entenderlo a profundidad requiere tener ya conocimientos de genética, un explicación clara sobre estas bases científicas se explican a continuación.

¿Que es el ADN?

El ácido deoxiribonucléico (ADN o DNA -desoxy-ribonucleic acid-) es una substancia química encontrada en todos los seres vivientes. El ADN, heredado de los padres biológicos, es la base de la herencia. Contiene el código para todos nuestros atributos físicos así como las instrucciones para todas las funciones del cuerpo, incluyendo crecimiento, desarrollo, y replicación. Es una molécula lineal compuesta de subunidades denominadas “bases” que se unen, una tras otra, como las cuentas de un collar.

¿El ADN de alguien es diferente al mío?

En terminos generales se puede decir que el ADN es muy parecido entre los individuos de la especie humana, esto es que 97% es común en todos. Existe ADN codificante y no codificante, esto es que potencialmente sirve o no. Dentro del codificante , existe ADN conservado y variable. Dentro del ADN codificante variable existen los STR (Short Tandem Repeats) que son regiones que varian mucho de individuo a individuo. Estas regiones son pequeñas , fáciles de amplificar y detectables por métodos convencionales  de biología molecular. Algunas de estas secuencias de STR son las que se análisan para determinar relaciones de parentesco y equivalen al 3% del genoma humano. La posición donde se encuentran los STR se llama locus (loci en plural) y son determinadas por el nombre de los marcadores que se usan.

¿Cómo se hace para analizar secuencias tan pequeñas y con tan poca muestra?

Gracias a la tecnología de PCR (polimerasa Chain Reaction) es posible amplificar pequeñísimas cantidades de ADN extraido de una muestra. En 32 ciclos de amplificación , los loci se pueden amplicar  1,000,000,000 (mil millones) de veces. Luego esto es bombeado a un detector de fluorescencia para una electroforesis capilar, esto para ser separados por color y tamaño. El resultado es un cromotograma de todos los loci, donde aparecen los alelos maternos y paternos.
Vea tambien Técnica de PCR. Concepto PCR

¿Cómo se determina un parentesco en base a estas regiones de STR?

El principio general es que el 50% del ADN es heredado por la madre y el otro 50% por el padre. Por lo que para cualquier secuencia se tiene un alelo materno y un alelo paterno. Una persona , por el lado de la madre puede heredar cinco repeticiones de un STR y por el lado del padre puede heredar doce repeticiones.
El principio de inclusión de paternidad es que un hijo debe tener un alelo  idéntico al uno del padre, esto para cualquier marcador o región de STR.

¿Es posible que otra persona tenga un mismo alelo para un STR?

Si, entre las mismas razas o regiones es posible que sea más común un STR. Es por esto que no se utiliza sólo uno, sino varios marcadores que determinan un perfil genético único, y que por varios factores son los idóneos para este tipo de pruebas. El FBI ha determinado como estándar 13 maqrcadores , sin embargo lo normal es el uso de 16 marcadores. Esta cantidad de marcadores permiten disminuir la posibilidad de una coincidencia a niveles de dos personas entre 3,000,000 millones para 15 marcadores comparativos. Es por esto que la confiabilidad puede llegar a niveles de 99.9999% o más. Esta exactitud, también depende de que tan “no comunes” son los alelos de cada persona, cuanto más “no comunes” mayor puede salir la inclusión de una paternidad.

Una exclusión significa que al menos 2 marcadores no coinciden entre padre e hijo, una “no coincidencia” puede ser provocada por una mutación, pero esto es poco común.

Fuente: http://www.pruebadepaternidad.info/?page_id=9


Preguntas frecuentes sobre pruebas de paternidad

Son muchas las preguntas que pueden formularse en lo que a los test de paternidad y análisis de ADN se refiere, por ello las empresas que se dedican a hacer este tipo de análisis se preocupan de responder a todas las dudas que les puedan surgir a sus clientes. Esta es una recopilación de sitios en los que podremos resolver nuestras dudas y algunas de las preguntas más comunes.

Pregruntas Más Frecuentes

¿Son las muestras de sangre mejores que las bucales?
R. No, su ADN es el mismo a través de todo su cuerpo. Por lo tanto, la fuente de la muestra del ADN no afecta la exactitud de la prueba genética de paternidad de ADN.Sin embargo las muetras de sangre en tarjeta FTA puede almacenarse por años, mientras que los cotonetes bucales , son suceptibles a humedad y descomposición microbiológica.

¿Que tan precisos son los resultados en las pruebas de ADN?
R. El testeo de paternidad a través de ADN es muy preciso, y los resultados a los que se llegan le dan la probabilidad de paternidad mayor a un 99.9% (inclusión) o un 0% (exclusión). Para relaciones entre hermanos y abuelos los resultados son concluyente en un rango que oscila entre un 90% (inclusión) o un 15% (exclusión).

¿Que quiere decir 100% exclusión de paternidad?

R. Quiere decir que el indice de paternidad es 0%, esto es que no existen probabilidades de sea el padre biológico. Aunque aveces algunos aleos podrían coincidir entre presunto padre e hijo, el hijo debe tener todos los alelos del padre.

¿Es necesario que la madre también se analice?

R. Para casos legales debe ser una exigencia, si la madre esta disponible . En casos informativos , no es indispensable , sin embargo el tener el perfil de la madre mejora mucho la exactitud del resultado. Pues por diferencia se puede segregar y comparar sólo la parte masculina del presunto hijo(a).

¿Se puede hacer pruebas de paternidad prenatales?

R. Si es posible. Sin embargo la dificultadad de obtener tejido provientes del no-nato lo hace complicado y riesgoso. Se debe hacer un procedimiento de amniocentésis para obtener líquido amniótico , esto tiene un riesgo para el embarazo . Sólo debe ser autorizado por el ginecólogo.

Existe una nueva forma de hacer la prueba con cerca de 40ml de la madre embarazada, no todos los laboratorio lo hacen. Sin embargo esta restringido a mujeres jóvenes que no hayan tenido embarazos previos.

¿Se puede hacer una prueba de paternidad sin el consentimiento de la madre?

sin el consentimiento de la madre?

R. En una prueba legal , de preferencia se debe tener la validación y muestra de la madre. El juez puede solicitar el muestreo, pero alguna parte puede negarse, lo que da la razón a la otra parte. Esto dependiendo de la legislación de cada país.

Al enviar muestras usando los kits, es posible que un padre envie muestras del niño sin conocimiento de la madre. Sin embargo esto nunca podría usarse en una corte. Además sería ilegal el muestreo si no es tutor (padre legal) del niño.

¿Porque algunos resultados de indice combinado de paternidad dan 99.98% y otros 99.9999995% ?, por ejemplo

R. El indice combinado depende de un cálculo estadístico basado en frecuencias de ocurrencia de alelos en cada raza. Si alguien tiene un alelo no comun en su raza , y si el niño también lo presenta , entonces este indice se eleva bastante. En cambio si las coincidencias es en alelos muy comunes, este indice es un poco más bajo, pero aún así para que se den exactitudes de 99.9% deben coincidir todos los alelos entre padre y niño.

Fuente: http://www.pruebadepaternidad.info/?page_id=3